六种主要实验室灭菌方法

鱼肚网2个月前疾病187
有效的实验室灭菌方法对于处理分离的细胞系至关重要。培养物必须在处理前进行消毒。


湿热(高压灭菌)


大多数实验室选择的实验室灭菌方法是高压灭菌:使用加压蒸汽加热要灭菌的材料。这是一种非常有效的方法,可以杀死微生物、孢子和病毒。


高压灭菌通过细胞蛋白质的水解和凝固来杀死微生物,这可以通过在水存在下的高温有效地实现。


强烈的热量来自蒸汽。加压蒸汽具有很高的潜热;在100°时,它所保持的热量是相同温度下水的7倍。这种热量在与待灭菌材料较冷的表面接触时释放,从而可以快速传递热量并良好地渗透致密材料。


六种主要实验室灭菌方法 疾病 第1张

干热(燃烧、烘烤)


干式加热与高压灭菌有一个重要区别。你已经猜到了——没有水,所以蛋白质水解不能发生。


相反,干热倾向于通过细胞成分的氧化来杀死微生物。这需要比蛋白质水解更多的能量,因此需要更高的温度才能通过干热进行有效灭菌。


例如,在121°下高压灭菌通常可以在15分钟内完成灭菌,而干加热通常需要 160° 的温度才能在相似的时间内灭菌。


六种主要实验室灭菌方法 疾病 第2张

过滤


过滤是一种无需加热即可快速消毒溶液的好方法。当然,过滤器的工作原理是让溶液通过而微生物无法通过的过滤器


过滤器可以是由热熔玻璃颗粒制成的烧结玻璃漏斗,或者现在更常见的是由纤维素酯制成的膜过滤器。为了去除细菌,通常使用平均孔径为 0.2um 的过滤器。


但请记住,病毒和噬菌体可以通过这些过滤器,因此如果存在这些问题,过滤不是一种好的实验室灭菌方法。


六种主要实验室灭菌方法 疾病 第3张

溶剂


乙醇通常用作消毒剂,但异丙醇是更好的脂肪溶剂,可能是更好的选择。


这两种溶剂都通过需要水的过程使蛋白质变性,因此它们必须在水中稀释到 60-90% 才能发挥作用


同样,重要的是要记住,尽管乙醇和 IPA 擅长杀死微生物细胞,但它们对孢子没有影响。


辐射


紫外线、X 射线和伽马射线都是对 DNA 具有深远破坏作用,它们之间的主要区别在于它们的渗透率


紫外线在空气中的穿透力有限,因此消毒只发生在灯周围相当小的区域。但是,它相对安全,并且对于对小区域(如层流罩)进行消毒非常有用。


X 射线和伽马射线的穿透性要强得多,这使得它们更危险,但对于制造过程中塑料物品(例如注射器)的大规模冷灭菌非常有效。


六种主要实验室灭菌方法 疾病 第4张

气体灭菌


环氧乙烷可用于对热或湿气敏感的设备进行消毒,通常用于对导管和支架等医疗设备进行消毒。环氧乙烷通过烷基化作用基本上阻止细胞代谢和复制。由于环氧乙烷很容易被吸收,因此灭菌后必须对设备进行充气以去除任何残留物。环氧乙烷也是剧毒的,会带来许多健康风险。由于它通常用于医疗保健产品,因此您不太可能在实验室中使用它。


所以,这些是一些主要的实验室灭菌方法。

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